cas:120550-35-8,Biotin-PFP,五氟苯酚生物素酯的描述
2025-10-31
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Biotin-PFP(生物素-五氟苯酯)是一種高活性生物素衍生物,它將生物素的高特異性親和識(shí)別能力與五氟苯酯(PFP)的強(qiáng)反應(yīng)活性相結(jié)合,成為生物分子偶聯(lián)、標(biāo)記及純化中的重要工具試劑,廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)及藥物研發(fā)領(lǐng)域。以下是對(duì)其核心特性的詳細(xì)闡述:
一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與組成
生物素模塊:屬于維生素B族成員,與親和素、鏈霉親和素形成較強(qiáng)的非共價(jià)結(jié)合(解離常數(shù)Kd≈10?1? M),是后續(xù)靶向捕獲、檢測(cè)、純化的核心單元。
五氟苯酯模塊:含五個(gè)氟原子的高活性酯基團(tuán),強(qiáng)親電性使其能高效捕捉氨基(優(yōu)先伯胺)或羥基,在溫和條件下形成穩(wěn)定的酰胺鍵或酯鍵,是實(shí)現(xiàn)與生物分子共價(jià)偶聯(lián)的關(guān)鍵。
二、物理性質(zhì)
外觀:白色至淡黃色粉末。
熔點(diǎn):190.0~194.0℃。
沸點(diǎn):555.3±50.0℃(預(yù)測(cè)值)。
密度:1.441。
溶解性:通常需用無水有機(jī)溶劑(如DMF、DMSO)溶解,因其對(duì)水和氧氣較為敏感,易發(fā)生降解。
儲(chǔ)存條件:需在-20℃、避光、干燥的惰性氣體(如氬氣)保護(hù)下儲(chǔ)存,以保證其穩(wěn)定性和活性。
結(jié)構(gòu)式:

三、反應(yīng)特性
高反應(yīng)活性:PFP基團(tuán)在溫和條件下(如pH 7-9、室溫至37℃)即可與生物分子(如蛋白質(zhì)、核酸、多肽)的氨基或羥基快速反應(yīng),形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。
反應(yīng)選擇性:優(yōu)先與伯胺反應(yīng),生成酰胺鍵,適用于蛋白質(zhì)N端或賴氨酸側(cè)鏈的標(biāo)記。
穩(wěn)定性:形成的生物素標(biāo)記產(chǎn)物在多種緩沖液和儲(chǔ)存條件下(如-20℃)可長(zhǎng)期保持活性。
四、應(yīng)用場(chǎng)景
蛋白質(zhì)修飾與標(biāo)記:
用于蛋白質(zhì)的熒光標(biāo)記、酶標(biāo)記或親和純化。例如,通過PFP-Biotin標(biāo)記抗體后,可利用鏈霉親和素磁珠進(jìn)行免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。
結(jié)合生物素-鏈霉親和素系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)復(fù)合物的富集與分析。
核酸標(biāo)記:
修飾寡核苷酸或RNA,用于原位雜交(ISH)、熒光原位雜交(FISH)或核酸pull-down實(shí)驗(yàn)。
作為高通量測(cè)序的接頭或探針的標(biāo)記物,提高檢測(cè)靈敏度。
細(xì)胞表面標(biāo)記與追蹤:
標(biāo)記細(xì)胞表面受體或抗原,結(jié)合熒光標(biāo)記的鏈霉親和素進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)或顯微鏡觀察。
通過生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的長(zhǎng)期追蹤和示蹤。
藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證:
標(biāo)記藥物分子或探針,研究其與靶標(biāo)的結(jié)合特性。
生物傳感器開發(fā):
利用生物素-鏈霉親和素的高親和力,構(gòu)建高靈敏度的生物傳感器。
藥物遞送系統(tǒng):
將生物素偶聯(lián)到藥物載體表面或納米顆粒上,通過親和素橋接實(shí)現(xiàn)靶向遞送或多功能載體構(gòu)建。
五、特點(diǎn)
高偶聯(lián)效率:PFP活性酯端可快速與氨基反應(yīng),生成穩(wěn)定共價(jià)鍵。
特異性強(qiáng):對(duì)氨基或羥基高度選擇性,減少副反應(yīng)。
生物素識(shí)別能力:與親和素結(jié)合力高,適用于多種免疫分析與檢測(cè)平臺(tái)。
多功能應(yīng)用:蛋白質(zhì)偶聯(lián)、抗體標(biāo)記、藥物載體修飾及傳感器構(gòu)建。
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